Análisis de los polimorfirmos de los genes MTHFR, XRCC1, PPARG y COX2 en el cáncer colorrectal esporádico

Abstract

El cáncer colorrectal es una de las patologías más frecuentes en los países desarrollados y en su etiología intervienen tanto factores ambientales como genéticos. En la presente tesis, hemos estudiado diez polimorfismos localizados en zonas reguladoras y codificantes de genes de baja penetrancia, relacionándolos con aspectos clínico-patológicos y genéticos del cáncer colorrectal esporádico, y realizando también un estudio funcional complementario de los polimorfismos analizados en las regiones reguladoras del gen COX2. Los genes seleccionados participan en diferentes sistemas y procesos, como el metabolismo del folato (MTHFR), el sistema de reparación BER (XRCC1), la homeostasis de lípidos e insulina (PPARG) y la inflamación (COX2). De los diez polimorfismos, sólo siete parecen tener una frecuencia suficientemente alta en población española: del gen MTHFR los polimorfismos c.677C>T (rs1801133) y c.1298A>C (rs1801131). Del gen XRCC1 el polimorfismo c.1196G>A (rs25487). Del gen PPARG, el polimorfismo c.34C>G (rs1805192), y por último, del gen COX2 los polimorfismos -765G>C (rs20417), c.2242T>C (rs5275), y c.3618A>G (rs4648298), no habiendo encontrado variantes de este gen en otros tres casos: c.3G>A (rs20426), c.2313G>A (rs5276) y c.3453T>C (rs13306035). Los resultados indican que el polimorfismo c.677C>T de MTHFR se asocia a un menor riesgo de padecer cáncer colorrectal y está relacionado con una mayor supervivencia de los pacientes que recibieron tratamiento quimioterapéutico con 5-Fluorouracilo (5-FU). El polimorfismo c.1298A>C, también de MTHFR, no influye en el riesgo de padecer cáncer colorrectal, aunque disminuye la supervivencia de los pacientes de nuestra serie globalmente, y de los que recibieron el tratamiento con 5-FU. Con respecto al gen XRCC1 del sistema BER, su polimorfismo c.1196G>A no parece ser determinante en el riesgo o el desarrollo de la enfermedad, asociándose su alteración a la ausencia de mutación en BAX y a la baja inestabilidad de microsatélites. Por otra parte, el polimorfismo c.34C>G del gen PPARG es protector respecto al riesgo de padecer cáncer colorrectal esporádico, relacionándose también su alteración con la pérdida de heterocigosidad del gen APC y la no alteración del oncogén KRAS2. Por último, los polimorfismos -765G>C y c.3618A>G del gen COX2 están relacionados con un buen pronóstico, de manera que los pacientes con el polimorfismo c.3618A>G presentan una mayor supervivencia. Los resultados funcionales in vitro, realizados mediante transfección en la línea celular SW480-ADH con insertos conteniendo estos polimorfismos, son coincidentes, ya que en los dos casos hemos observado una bajada de los niveles de proteína reportera, lo que implicaría una menor cantidad de COX2 en las células tumorales conteniendo las secuencias variantes y, por tanto, contribuyen al mejor pronóstico. Por el contrario, el polimorfismo c.2242T>C no se relaciona con el buen pronóstico y no origina una alteración de los niveles de proteína, aunque se encuentra en desequilibrio de ligamiento con los dos anteriores. Finalmente, el estudio de varias regiones reguladoras de la 3’UTR del gen COX2 (COX4 y COX5) nos ha permitido esclarecer la regulación ejercida por sus elementos internos, de forma que la regulación postranscripcional (estabilidad del ARNm y tasa de traducción) ejercida por las AREs de la región 3’UTR no parece mostrar siempre un efecto aditivo, sino que la situación debe ser más compleja, pudiendo ejercerse efectos incluso contrapuestos.