Clonal analysis of neural progenitors

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dc.contributor.advisor López Mascaraque, Laura (dir.)
dc.contributor.author Figueres Oñate, María
dc.contributor.other UAM. Departamento de Anatomía, Histología y Neurociencia es_ES
dc.contributor.other C.S.I.C. Instituto Cajal es
dc.date.accessioned 2017-02-28T12:19:17Z
dc.date.available 2017-02-28T12:19:17Z
dc.date.issued 2016-10-28
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10486/677263
dc.description Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Anatomía, Histología y Neurociencia. Fecha de lectura: 28-10-2016 es_ES
dc.description Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 28-04-2018 es_ES
dc.description.abstract A key question in developmental neurobiology is how a pool of progenitors proliferates and differentiates to create an adult brain of appropriate size and cellular composition. So important is the control of the final size, as the appropriate distribution of cells with different embryonic origins. Each neural progenitor should produce a certain number of neuronal/glial cells encompassing a clone, and all these clones together will result in the adult functional nervous system. The overall goal of this thesis was aimed to develop an in vivo lineage-tracing genetic method to trace all the neural progeny derived from a single cell, UbC-StarTrack. This will allow to follow cell dispersion of the progeny from embryonic and postnatal mice neural progenitors, independently of their lineage. To validate the method we selected as an experimental system the olfactory bulb, since it is one of the main regions of embryonic and adult neurogenesis. Then, the main experimental approach was based on gene transfection by electroporation with a combination of diverse fluorescent reporter proteins. This produced inheritable marks that enabled the long-term in vivo tracing of the different neural cells from its generation, during embryonic development, to its final fate in the adult brain. First, we analyzed the fate of embryonic progenitors lining either the ventricular surface or the ependymal layer of the olfactory bulbs. Second, we addressed the fate of postnatal progenitors form the dorsolateral region of the ventricular surface, to finally perform a clonal analysis of newly generated olfactory bulb cells from those postnatal SVZ progenitors. This thesis will advance the understanding of cell heterogeneity that can be decoded by studying their ontogenetic origin, and could yield to track cell lineages to understand their functional clonal relationships. en_US
dc.description.abstract Una de las preguntas más importantes en Neurobiología del Desarrollo es como un grupo de progenitores prolifera y se diferencia para crear un cerebro con el tamaño y composición celular adecuado. Tan importante es el control del tamaño final, como la correcta distribución de células con distinto origen embrionario. Cada progenitor debe generar un determinado numero de células gliales/neuronales y estos clones resultarán en el sistema nervioso central adulto funcional. El objetivo general del trabajo presentado en esta Tesis Doctoral fue generar un método de análisis clonal ubicuo con el propósito de trazar toda la progenie de células individuales, seguir clones pertenecientes a distintos linajes neurales provenientes de progenitores tanto embrionarios como postnatales. El método desarrollado se basa en la identificación de células hermanas mediante el análisis del especifico código de colores que expresan, generado por la combinación aleatoria de distintos reporteros fluorescentes en las células progenitoras y transmitido de manera equitativa a toda la descendencia. Los estudios de análisis clonal de los distintos linajes neurales se han centrado en el sistema olfativo del ratón, ya que es uno de los centros donde tiene lugar la neurogénesis tanto en estadios embrionarios como postnatales. El principal enfoque experimental llevado a cabo, se basa en la transfección mediante electroporación de distintos constructos genómicos que expresan proteínas fluorescentes diferentes bajo un promotor ubicuo. Esto produce marcas estables hereditables que permiten el marcaje in vivo a largo plazo de células neurales desde su generación en el desarrollo embrionario hasta su destino final en el cerebro adulto. El presente trabajo de tesis contiene los detalles de la generación de un método ubicuo de análisis clonal al que hemos denominado UbC-StarTrack, en primer lugar haciendo una comparativa de la expresión de vectores integrados en el genoma vs. vectores que permanecen sin integrar. En segundo lugar, hemos analizado la descendencia de progenitores embrionarios, posicionados en la superficie del ventrículo lateral o de la zona ependimaria intrabulbar, que convergen en el bulbo olfativo adulto. Seguidamente, examinamos el destino de progenitores postnatales localizados en la región dorso-lateral adyacente a los ventrículos laterales. Para concluir, mostramos los resultados clonales preliminares obtenidos con el método de análisis clonal desarrollado en las células generadas a partir de progenitores postnatales, implicadas en la neurogénesis en adulto que tiene lugar en el sistema olfativo del ratón. Con todo esto, este trabajo de Tesis Doctoral exhibe un avance en el conocimiento de la heterogeneidad celular, siendo ésta decodificada a través de su ontogenia. Además, abre un nuevo campo al estudio de los distintos tipos celulares no sólo por su linaje sino por su relación clonal, haciendo posible el análisis de la interrelación entre los clones obtenidos y sus implicaciones fisiológicas. es_ES
dc.format.extent 177 pag. es_ES
dc.format.mimetype application/pdf en
dc.language.iso eng en
dc.subject.other Células madre neurales -Tesis doctorales es_ES
dc.title Clonal analysis of neural progenitors en-US
dc.type doctoralThesis en
dc.subject.eciencia Medicina es_ES
dc.date.embargoend 2018-04-28
dc.rights.cc Reconocimiento – NoComercial – SinObraDerivada es_ES
dc.rights.accessRights openAccess en


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