Obtención de células tumorales con expresión de luciferasa para su seguimiento in vivo en un modelo experimental de leucemia linfocítica crónica
Entity
UAM. Departamento de MedicinaDate
2019-03-11Subjects
Células tumorales - Tesis doctorales; Leucemia linfática crónica - Tesis doctorales; Luciferasas - Tesis doctorales; MedicinaNote
Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Medicina. Fecha de lectura: 11-03-2019Esta obra está bajo una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional.
Abstract
La cepa murina New Zealand Black (NZB) presenta de forma espontánea una
proliferación clonal de linfocitos tumorales B CD5+ que se manifiesta en edades
avanzadas. Por la similitud de esta linfoproliferación con la que aparece en la leucemia
linfocítica crónica (LLC) en humanos, la cepa NZB constituye un modelo experimental de
esta enfermedad.
El trasplante de linfocitos tumorales procedentes de individuos NZB con enfermedad
linfoproliferativa a ejemplares NZB jóvenes, logra anticipar la aparición de la
enfermedad, permitiendo su uso como modelo preclínico de LLC. El objetivo de este
trabajo era implementar el modelo para el seguimiento in vivo de las células tumorales
marcadas con un trazador bioluminiscente por medio de la aplicación de técnicas de
imagen no invasivas. Las células tumorales de NZB, al igual que las células de LLC
humanas, tienen una gran dependencia del microambiente, siendo difíciles de cultivar.
Por ello, inicialmente se estandarizó un sistema de cultivo que permitía la expansión y
el mantenimiento in vitro de las células tumorales, así como su posterior infección
lentiviral.
Estas células tras su paso por cultivo, infección y trasplante a individuos NZB jóvenes,
generaban una enfermedad semejante a la espontánea, pero no fue posible su
seguimiento in vivo debido a la pérdida de expresión del trazador. A pesar de la dificultad
en la obtención de células NZB con expresión estable del trazador bioluminiscente, sí ha
sido posible el seguimiento in vivo de las células tumorales durante seis meses en un
individuo inmunodeprimido de la cepa NOD/SCID con una de las construcciones
lentivirales ensayadas. Así pues, parece que con esta construcción sería posible
conseguir el establecimiento definitivo del modelo preclínico de LLC en la cepa NZB para
seguimiento por imagen in vivo.
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PDF
Description
Texto de la Tesis Doctoral
Google Scholar:Martínez González, Andrea Ruth
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