Aislamiento y caracterización de mutantes que suprimen los efectos tóxicos de azúcares sobre mutantes fosfoglicerato mutasa negativos de Saccharomyces cerevisiae

Abstract

La glucosa, al igual que otros azúcares, inhibe el crecimiento de mutantes glícolíticos de levadura en fuentes de carbono alternativas, probablemente por la represión de las enzimas necesarias para la utilización de dichas fuentes. En un intento de identificar genes implicados en la(s) mta(s) de señalización de la presencia de azúcares en Saccharomyces cerevisiae, se han buscado mutaciones supresoras que permitieran crecer a mutantes glicolíticos en presencia de azúcares. Utilizando como material de partida un mutante afectado en el gen GPMI, que codifica la fosfoglicerato mutasa, hemos aislado una serie de mutantes portadores de mutaciones supresoras de los efectos tóxicos de varios azúcares para esta cepa. Una de las mutaciones caracterizadas, que suprimía específicamente la toxicidad de galactosa, resultó afectar al gen GAU, un regulador de la síntesis de los genes GAL. En un mutante ga14 con baja expresión de los genes GAL, el consumo de galactosa es bajo y se libera la represión catabólica de una serie de genes que permiten al mutante original crecer en presencia de este azúcar. Se ha aislado un mutante con una mutación dominante, DDR2-I, que suprime los efectos de glucosa, fnictosa y galactosa. El flujo glicolítico no está afectado por esa mutación. Durante el crecimiento en glicerina+etanol+glucosa, los niveles de metabolitos ensayados en el mutante DDR2-1 fueron similares a los de la cepa parental, excepto en el caso de las triosa fosfatos que eran ligeramente mayores en el mutante. La caracterización del gen responsable de la mutación está en curso. Otros mutantes aislados estaban afectada en la hexokinasa 2 o en la fosfofructokinasa. Estos mutantes resistían el efecto de los tres azúcares antes mencionados.