Caracterización de una nueva "beta"-lactamasa plasmídica de tipo AmpC EN Klebsiella pneumoniae
Author
González Leiza, Silvia M.Advisor
Baquero Mochales, FernándoEntity
UAM. Departamento de Biología MolecularDate
1993-10-14Subjects
Beta-lactamasas-Tesis doctorales; Biología y Biomedicina / BiologíaNote
Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular, 14-10-1993Abstract
La cepa de Klebsiella pneumoniae BA32, aislada en un hospital de Buenos IC
\A
Aires (Argentina), es productora de una B-lactamasa plasmídica (FOX-1) que f
' confiere resistencia a cefalosporinas de amplio espectro y cefamicinas. Esta b
resistencia es capaz de ser transferida a E. coli K-12 mediante conjugación y !í
transformación por medio de un plásmido de aproximadamente 48.5 Kb (pGLKl), N
12
que produce dos formas enzimáticas de pIs 6.8 y 7.2 y diferentes pesos moleculares E Ji de 37.000 y 35.000 Da. respectivamente. p: r i
6
El estudio cinético de FOX-1 reveló que las dos variantes moleculares tienen ,'
perfiles de sustrato y de inhibición muy similares que recuerdan a los producidos por
wcefalosporinasas
cromosómicas del grupo 1 (17), clase molecular C (2). Los estudios b+, f'
\ in vitro indicaron una mayor actividad hidrolítica sobre cefalotina y cefaloridina que f
sobre penicilina y cefoxitina. El perfil de inhibición de FOX-1 es también muy
similar a este grupo de B-lactamasas cromosómicas del grupo 1 cuya actividad es [ 1 d.
&2 pobremente inhibida por el ácido clavulánico (CIsO> 1000nM), pero sensible a bajas
@,
L concentraciones de cloxacilina y aztreonam (CI, 20 nM y 25 nM, respectivamente). $Y[ ,?
5
El gen estructural que codifica para FOX-1 Vox-1) fue clonado en un 16 <
fragmento PstI-PstI de 2.27 Kb y expresado en E. coli K-12. La secuencia de 382 \>
aminoácidos traducida de la secuencia nucleotídica de 1.149 pb de fox-1 presenta
un alto grado de homología con B-lactamasas cromosómicas de tipo AmpC de P. 1 ";
k2 F aeruginosa, S. marcescens, E. cloacae* E. coli y C. freundii (43-55%) lo cual
sugiere el posible origen cromosómico de esta enzima. La ausencia de una secuencia dxv
típica de reconocimiento para la peptidasa señal podría ser la causa de que se 1F \
procesaran dos formas maleculares con diferente pI y PM codificadas por un único !-,, , c
gen.
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