Estudio de las poblaciones celulares Th17 y Thf en la patogenia de la artritis reumatoide

Abstract

La artritis reumatoide (AR), es una enfermedad autoinmune sistémica, caracterizada por la inflamación crónica de las articulaciones, la destrucción del cartílago y las erosiones óseas. Numerosos estudios indican que la interleuquina 17 (IL-17) desempeña un papel importante en la patogenia de la AR. Ratones deficientes para IL-17 muestran una forma atenuada de artritis inducida por colágeno y el tratamiento con anti-IL-17 en este mismo modelo murino de AR, se asocia con una reducción significativa de la gravedad. En estudios en humanos, se han observado niveles altos de IL-17 en el líquido sinovial de pacientes con AR y se ha detectado la producción de IL-17 en células T CD4+ de la membrana sinovial de AR. Un porcentaje alterado de las células Th17 ha sido descrito en sangre periférica y líquido sinovial de pacientes con AR, pero hasta la fecha los datos encontrados son contradictorios. Por otro lado, las células B también participan en la patogenia de la AR a través de la producción de autoanticuerpos. Las células T helper foliculares (Thf), promueven la maduración de las células B y la producción de anticuerpos. Estas células juegan un papel importante en la autoinmunidad, se ha descrito un aumento del número células Thf en modelos murinos de artritis inflamatoria. Las células Thf clásicas se encuentran en los órganos linfoides secundarios. Varios autores han descrito poblaciones de células T CD4+CXCR5+ circulantes que muestran características fenotípicas y funcionales de células Thf. El aumento de la frecuencias de estos homólogos circulantes de células Thf (Thfc) se ha asociado con enfermedades autoinmunes. Recientemente, se han descrito subpoblaciones de células Thfc que se caracterizan y clasifican según la expresión diferencial de los receptores de chemoquinas CXCR3 y CCR6 en células T CD4+CXCR5+ y que muestran diferencias funcionales en cuanto a su capacidad de ayudar a los linfocitos B. Un equilibrio alterado de estas subpoblaciones de Thfc se ha asociado con la patogenia de varias enfermedades autoinmunes, pero hasta donde sabemos estas subpoblaciones no han sido estudiadas en AR. Por lo tanto, nuestro primer objetivo fue examinar la frecuencia y el fenotipo de las células Th17 en sangre periférica de pacientes con AR de reciente comienzo (ARo), y en líquido sinovial de pacientes con AR establecida. Observamos una disminución significativa de la frecuencia de células Th17 y Th17/Th1 circulantes en pacientes ARo ACPA+, que asciende hasta los valores observados en los controles, tras el inicio del tratamiento con metotrexato. La frecuencia basal de células Th17 circulantes se correlacionó significativamente con el título de ACPA y con la presencia o ausencia de erosiones basales. Nuestro segundo objetivo era estudiar la frecuencia de las células Thfc, las subpoblaciones de Thfc y los plasmablastos circulantes, en pacientes con AR. Observamos que los pacientes con AR muestran una mayor frecuencia de células Thfc CD4+CXCR5+ICOS+ junto con una sobrerrepresentación de las subpoblaciones de células Thfc con fenotipo ayudador de linfocitos B. Por otro lado, sólo los pacientes con AR con enfermedad activa mostraban una mayor proporción de plasmablastos circulantes.

Rheumatoid Arthritis (RA), a systemic autoimmune disease, is characterized by chronic joint inflammation, cartilage destruction and bone erosions. Numerous experimental data indicate that interleukin 17 (IL-17) plays an important role in the pathogenesis of RA. IL-17 deficient mice demonstrate a markedly attenuated form of collagen-induced arthritis and anti- IL-17 therapy in this mouse model of RA is associated with a significant reduction of severity. In human studies, high levels of IL-17 have been observed in the synovial fluid of patients with RA and IL-17 producing CD4+ T cells have been detected in RA synovial membranes. An altered percentage of Th17 cells has been described in the peripheral blood and synovial fluid of RA patients, but to date conflicting data have been reported. On the other hand, B cells also actively participate in RA pathogenesis through the production of autoantibodies. Follicular helper T cells (Tfh), promote B cell maturation and antibody production. Tfh cells play an important role in the pathogenesis of autoimmunity, and increased numbers have been described in murine models of inflammatory arthritis. Classical Tfh cells are located in secondary lymphoid organs. Several reports have subsequently described circulating populations of CD4+CXCR5+ T cells that display both phenotypic and functional features of true Tfh cells. Increased frequencies of circulating Tfh cell counterparts (cTfh) have been associated with autoimmune diseases. More recently, phenotypic and functionally distinct subpopulations of cTfh cells have been described, according to the differential expression of the chemoquine receptors CXCR3 and CCR6 on CD4+CXCR5+ T cells. An altered balance of these cTfh subsets is associated with the pathogenesis of autoimmunity but to our knowledge has not been investigated in RA. Therefore, our first objective was to examine the frequency and phenotype of Th17 cells in the peripheral blood of early RA (eRA) patients, and in the synovial fluid of patients with established RA. We have observed a significantly decreased frequency of circulating Th17 and Th17/Th1 cells in ACPA+ eRA patients that increase up to values observed in controls during follow-up after initiating treatment with methotrexate. The basal circulating Th17 frequency was significantly correlated with the titre of ACPA and with the presence or absence of basal erosions. Our second objective was to study the frequency of cTfh and cTfh cell subsets together with the frequency of circulating plasmablast in patients with RA. We observed that RA patients demonstrate an increased frequency of cTfh CD4+CXCR5+ICOS+ together with an overrepresentation of cTfh subsets bearing a phenotype associated with B cell helping capacity. In contrast, only RA patients with active disease show an increased proportion of circulating plasmablasts.