Mañana, JUEVES, 24 DE ABRIL, el sistema se apagará debido a tareas habituales de mantenimiento a partir de las 9 de la mañana. Lamentamos las molestias.
Utilización del contenido de vesículas extracelulares circulantes en sangre periférica para el manejo clínico de pacientes con gliomas
Author
García Romero, NoemíEntity
UAM. Departamento de BioquímicaDate
2017-02-24Subjects
Sistema nervioso central - Tumores - Tesis doctorales; MedicinaNote
Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica. Fecha de lectura: 24 de febrero, 2017Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 24-08-2018
Esta obra está bajo una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional.
Abstract
Los gliomas son los tumores primarios más comunes en el Sistema Nervioso Central. El Glioblastoma (GBM) es el tumor primario de origen glial más frecuente y agresivo, con una supervivencia media que rara vez supera los 15 meses. El fracaso terapéutico se debe en parte a la existencia de una población celular denominada células iniciadoras de tumor (CIT) a las que se les atribuye la responsabilidad del inicio del tumor, de la invasividad y la resistencia a los tratamientos actuales. Por lo que las CIT se han propuesto como el mejor modelo pre-clínico para el estudio de los gliomas. En este trabajo nos planteamos el estudio de la evolución in vitro de cultivos primarios aislados de muestras quirúrgicas de pacientes diagnosticados con GBM, así como analizamos su patrón de diseminación en ratones inmunodeprimidos. Nuestros resultados muestran que las CIT son susceptibles de evolucionar a lo largo de los pases en cultivo, presentando eventos de inestabilidad cromosómica, un aumento en la expresión de marcadores específicos de CIT y de troncalidad, además de fluctuaciones importantes en su perfil de viabilidad y en el patrón de respuesta a fármacos.
El hecho de que las CIT secreten vesículas extracelulares (VEs) al espacio extracelular y que estas VEs transporten material genético de las células productoras, ha hecho que se postulen como uno de los mejores tipos de biopsia líquida disponibles en la actualidad. Sin embargo, en la mayoría de los gliomas de bajo grado la barrera hematoencefálica (BHE) mantiene su estructura, por lo que su liberación al torrente sanguíneo puede estar limitada. Para ello creamos un modelo animal xenotrasplantado con CIT que presentaba la BHE intacta, de esta manera hemos creado una metodología indirecta que nos permite separar las VEs procedentes del tumor de las del propio ratón. En dicho modelo demostramos por primera vez que los tres tipos de VEs: cuerpos apoptóticos, vesículas de shedding, y exosomas, son capaces de atravesar la BHE y aparecer en el torrente sanguíneo llevando en su interior secuencias de ADNg secretadas por el tumor. Finalmente, demostramos la presencia de IDH1G395A en las VEs aisladas de sangre periférica procedente de una cohorte de pacientes diagnosticados con gliomas de bajo y alto grado, lo que supone un método minimamente invasivo para la detección de este marcador esencial para el diagnóstico, pronóstico y seguimiento de los pacientes. Gliomas are the most common primary tumors in the central nervous system. Glioblastoma (GBM) is the most frequent and aggressive glial primary tumor, with an average survival of 15 months. The therapeutic failure is in part due to the existence of a cell population call cancer initiating cells (CIT), which are considered to be responsible for tumor initiation, invasiveness and resistance to current therapy. For this reason, CIT have been proposed as the best pre-clinical model for glioma studies. In this work we investigated the in vitro evolution of primary cell cultures isolated from GBM patients’s surgical samples, as well as their dissemination pattern in immunocompromised mice. Our results demonstrated that CIT evolve along the passages in culture, showing chromosomic instability events, increased stemness marker expression, as well as significant variation in viability rates and response to drug treatment.
CIT secrete extracellular vesicles (EVs), which carry genetic cargo of originating cells and have been proposed as one of the best type of liquid biopsy available nowadays. However, most low-grade gliomas maintain intact blood-brain barrier (BBB), which might limit EV release into the bloodstream. We used orthotopic xenotransplant mouse model of GBM-CIT featuring an intact BBB. We demonstrated for the first time, that all EV types — apoptotic bodies, shedding microvesicles and exosomes — cross the BBB and can be detected in peripheral blood carrying gDNA secreted by tumor cells.
Finally, we demonstrated the presence of IDH1G395A mutation inside EVs isolated from from a cohort of low and high grade glioma patients’ peripheral blood, which provides a minimally invasive method to detect this marker essential for diagnosis, prognosis and patient follow-up.
Files in this item
Google Scholar:García Romero, Noemí
This item appears in the following Collection(s)
Related items
Showing items related by title, author, creator and subject.
-
DNA sequences within glioma-derived extracellular vesicles can cross the intact blood-brain barrier and be detected in peripheral blood of patients
García-Romero, Noemí; Carrión-Navarro, Josefa; Esteban-Rubio, Susana; Lázaro-Ibáñez, Elisa; Peris-Celda, María; Alonso, Marta M.; Guzmán-de-Villoria, Juan; Fernández-Carballal, Carlos; Ortiz de Mendivil, Ana; García-Duque, Sara; Escobedo-Lucea, Carmen; Prat-Acín, Ricardo; Belda-Iniesta, Cristóbal; Ayuso-Sacido, Ángel
2016-11-26 -
Podoplanina es un componente de vesículas extracelulares que reprograma el contenido proteico de exosomas y modula la formación de vasos linfáticos
Carrasco Ramírez, Patricia
2016-04-21