Effect of the tyrosine kinase inhibitor dasatinib on lymphocyte trafficking

Abstract

Dasatinib es un inhibidor de la actividad tirosín quinasa (ITK) de la proteína oncogénica de fusión BCR-ABL1 aprobado para la leucemia mieloide crónica (LMC) y la leucemia linfoblástica aguda cromosoma Philadelphia (Ph+) positivas. Por su parte, el linfoma de células del manto (LCM) es un linfoma agresivo sin tratamiento curativo pero que presenta respuesta terapéutica a otros ITK. Con estos antecedentes nos planteamos que dasatinib podría ser una opción terapéutica para el LCM. Sin embargo, los estudios funcionales de adhesión y migración con células de LCM no aportaron resultados prometedores. Aunque dasatinib es efectivo y bien tolerado, los pacientes experimentan una linfocitosis transitoria cuyo pico se alcanza a las 2 horas de la toma del fármaco y se resuelve espontáneamente a las 4 horas. Esta linfocitosis, de causa desconocida, se ha asociado a una mejor respuesta al tratamiento, por lo que identificar su mecanismo es de interés clínico. Para dilucidar los mecanismos de la linfocitosis, realizamos ensayos in vitro que sugerían que dasatinib mediaba un defecto en la adhesión de linfocitos humanos sanos al endotelio y en la migración de células B. Experimentos in vitro demostraron que en linfocitos B murinos, dasatinib también causaba una importante inhibición de la migración hacia las quimioquinas homeostáticas CCL21, CXCL12 y CXCL13, expresadas constitutivamente en los órganos linfoides secundarios (OLS). Sin embargo, la quimiotaxis de las células T permaneció inalterada. Estos resultados no se tradujeron, in vivo, en un defecto sobre el homing linfocitario en un modelo murino capaz de reproducir la linfocitosis. En cambio, dasatinib causó una reducción del tamaño del bazo, que se correlacionaba con un aumento de la salida de linfocitos de los OLS. Una vez descartada la implicación del eje S1P1/S1PR1, que juega un papel esencial en la salida de los linfocitos de los OLS, nos planteamos que los efectos de dasatinib en el tráfico linfocitario pudieran ser debidos a efectos indirectos en otros tipos celulares. Nos centramos en las células fibroblásticas reticulares (FRCs), por su papel principal en el mantenimiento del tamaño y la estructura de los OLS. La inhibición farmacológica de ROCK con Y27632 revirtió parcialmente la linfocitosis y la salida de los linfocitos del bazo in vivo. In vitro, dasatinib compensó parte del acusado efecto que este inhibidor ejerce sobre la dinámica de la actina en las FRCs. Además, el análisis por microscopía intravital reveló un profundo efecto en la motilidad tanto de los linfocitos B como T en ratones tratados con dasatinib. Por último, datos preliminares de un estudio actual confirmaron que la reducción del tamaño del bazo ocurre también en pacientes de LMC tratados con dasatinib, a la vez que muestran linfocitosis. En resumen, nuestros datos sugieren que las alteraciones del microambiente de los OLS, y en particular de las células estromales, podrían interferir en la recirculación linfocitaria, constituyendo un mecanismo para explicar la linfocitosis inducida por dasatinib