El Virus de la Peste Porcina Africana modula la vía de señalización de la respuesta innata cGAS-STING: Papel del gen viral MGF505-2R

Abstract

El Virus de la Peste Porcina Africana (VPPA), el único miembro de la familia Asfaviridae, es un complejo virus citoplasmático. Su genoma de doble cadena de ADN codifica entre 150 y 170 genes, muchos de ellos relacionados con la interacción con múltiples funciones celulares y la evasión del sistema inmune del huésped, lo hacen uno de los virus más complejos conocidos. El VPPA es el agente causante de la Peste Porcina Africana (PPA), una enfermedad letal para cerdos domésticos y jabalíes, que se encuentra en expansión por todo el mundo provocando una gran preocupación para el ecosistema y el sector agrario ya que no existe vacuna comercial frente a esta enfermedad. Existen distintas cepas de VPPA en función de su virulencia. Estas diferencias se deben a la expresión diferencial de genes involucrados en contrarrestar la respuesta inmune, siendo las cepas más virulentas las que codifican y expresan estos genes. Aquí describimos la activación y modulación de una de las principales vías de señalización del sistema inmune innato, la vía de señalización de cGAS-STING, tras la infección por el VPPA. La detección del ADN viral en el citoplasma por el sensor cGAS conduce secuencialmente a la activación de STING, la fosforilación de TBK1, STING e IRF3 y finaliza en la producción de IFN-. En particular, la cepa virulenta Armenia/07 es capaz de controlar la producción de IFN-β a través de la modulación de la vía celular cGAS-STING, mientras que la cepa atenuada NH/P68 no lo hace. El genoma del aislado atenuado NH/P68 carece de muchos genes relacionados en la evasión inmune presentes en diferentes aislados virulentos de VPPA, entre los que se encuentra MGF505-2R. Este gen no esencial de expresión tardía contiene el motivo "LxCxE", implicado en la unión a STING para la señalización de la vía cGAS-STING. En la segunda parte de esta tesis hemos determinado que MGF505-2R interacciona con STING y modula negativamente la producción de IFN-β al impedir la fosforilación de IRF3 y TBK1. La generación del virus recombinante ArmC2MGF505-2R-GFP confirmó la implicación del gen MGF505-2R en la modulación de la vía de cGAS-STING ya que, en su ausencia, se detectó una mayor fosforilación de STING, TBK1 e IRF3 y altos niveles de ARNm de IFN- en comparación con la infección de ArmC2WT. Por otra parte, el virus recombinante ArmC2MGF505-2R-GFP presentó un fenotipo completamente atenuado en animales infectados y, además, generó anticuerpos específicos frente al VPPA otorgando protección en un 75% de los animales vacunados tras ser expuesto al desafío con ArmC2WT. En conjunto, estos resultados implican a MGF505-2R como un inhibidor de la vía cGAS-STING con un papel en la virulencia del VPPA y al virus recombinante ArmC2-ΔMGF505-2R-GFP como un prometedor prototipo vacunal