Identificación de un nuevo sistema de dos componentes y tres proteasas implicados en la respuesta al estrés por secreción en Streptomyces lividans

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dc.contributor.advisor Pérez Mellado, Rafael (dir.)
dc.contributor.advisor Gullón Blanco, Sonia (dir.)
dc.contributor.author López Vicente, Rebeca
dc.contributor.other UAM. Departamento de Biología Molecular es_ES
dc.contributor.other Centro Nacional de Biotecnología es_ES
dc.date.accessioned 2014-05-05T11:21:42Z
dc.date.available 2014-05-05T11:21:42Z
dc.date.issued 2013-10-29
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10486/660251
dc.description Tesis doctoral inédita. Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de lectura: 29-10-2013 es_ES
dc.description.abstract La acumulación de proteínas mal plegadas fuera de la membrana citoplasmática de la bacteria puede interferir con la maquinaria de secreción, es por ello que la existencia de factores de control de calidad que eliminen las proteínas mal plegadas resulta de gran importancia en bacterias que son productoras eficientes de proteínas de secreción. Para responder al estrés producido por la acumulación de proteínas incorrectamente plegadas estas bacterias normalmente emplean sistemas de dos componentes específicos que activan la expresión de proteasas de tipo HtrA que eliminan de forma específica las proteínas extracelulares plegadas incorrectamente (Sarvas y col., 2004). La sobreproducción de alfa-amilasa en S. lividans, una bacteria Gram-positiva frecuentemente empleada para la producción industrial de proteínas, provoca un estrés por secreción producido por acumulación de alfa-amilasa incorrectamente plegada. En estas condiciones, hemos identificado un sistema de dos componentes (CssR-CssS) que regula la transcripción de tres genes que determinan la síntesis de proteasas de tipo HtrA, las cuales parecen estar implicadas en la respuesta a este estrés. Estirpes mutantes en cada uno de los genes que forma parte del operón que codifica el sensor (CssS) y el regulador (CssR), acumulan proteína no funcional fuera de la célula, confirmando que este sistema de dos componentes está implicado en la respuesta al estrés por secreción en S. lividans. Ensayos de retardo en gel con el regulador CssR purificado nos han permitido establecer que los genes que codifican las tres proteasas de tipo HtrA, así como el primer gen del operon del sistema de dos componentes, parecen ser dianas de regulación directa de CssR. Por otra parte, mutaciones en cada uno de los genes de las proteasas sugieren que la acción conjunta de las tres proteasas es necesaria para la eliminación de la proteína incorrectamente plegada. Adicionalmente, la sobreproducción de cualquiera de los genes de las proteasas provoca una disminución de la cantidad de alfa-amilasa activa, apuntando a que un exceso de una de las proteasas puede causar una descompensación en su acción, provocando efectos negativos en la calidad de la proteína secretada. es_ES
dc.format.extent 177 pag. es_ES
dc.format.mimetype application/pdf es_ES
dc.language.iso spa es_ES
dc.rights Atribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 España *
dc.rights.uri http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/es/ *
dc.subject.other Streptomyces - Tesis doctorales es_ES
dc.title Identificación de un nuevo sistema de dos componentes y tres proteasas implicados en la respuesta al estrés por secreción en Streptomyces lividans es_ES
dc.type doctoralThesis es_ES
dc.subject.eciencia Biología y Biomedicina / Biología es_ES
dc.rights.cc Reconocimiento – NoComercial – SinObraDerivada es_ES
dc.rights.accessRights openAccess


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